Terasaki Biyomedikal İnovasyon Enstitüsü (TIBI), bir tanısal kanser biyobelirteç olarak hareket etme potansiyeline sahip gözyaşı gibi vücut salgılarında bulunan nanometre boyutundaki vezikülleri, eksozomları yakalayıp tespit edebilen bir kontakt lens geliştirdi.
Eksozomlar çoğu hücrede oluşur ve idrar - gözyaşı gibi vücut sıvılarına salgılanır. Hatta eksozomların, orijinal hücrelerden istenmeyen maddeleri topladıklarına inanılıyordu; bununla birlikte, eksozomlar aslında hücreler arasında farklı biyomolekülleri taşıyabilir. Eksozomlar, kansere, viral enfeksiyonlara veya yaralanmaya yanıt olarak artan proteinlere sahiptir.
Eksozomlar, teşhis ve tedavi tahminine yardımcı olarak potansiyel bir kanser biyobelirteci olarak hareket etme yetenekleriyle ilgi uyandırdı. Eksozomları yeterli miktarda ve saflıkta izole etmenin zorlu doğası nedeniyle, bu araştırmalar kısıtlıydı. Eksozomları izole etmek için mevcut yöntemler, tamamlanması yaklaşık 10 saat süren ultrasantrifüj ve yoğunluk gradyanlarını içerdiğinden sıkıcı ve zaman alıcıdır. İzole edilmiş eksozomların saptanmasında başka zorluklar da vardır ve yaygın olarak kullanılan yöntemler, pahalı - yer kaplayan ekipmanlar gerektirir.
Bilim insanları, kanser biyobelirteçlerini tespit etmenin potansiyel bir yolu olarak gözyaşlarında bulunan eksozomları yakalamak için kontakt lensler geliştirdiler. Antikor konjuge sinyal mikro oda kontakt lenslerini (ACSM-CL) oluşturarak zorlu izolasyon yöntemleri gereksinimini ortadan kaldırmak için kontakt lens biyosensör tasarımı ve üretimindeki uzmanlıklarını kullandılar. Teknoloji, kanser biyobelirteçlerini keşfetmek için daha temiz ve daha optimum yöntem olan gözyaşlarından eksozomları yakalıyor.
Ekip, ACSM-CL'yi optimize ederken alternatif yaklaşımlar kullandı; hem odaların hem de merceğin yapısal olarak tutulması için geleneksel döküm kalıplama yerine doğrudan lazer kesim ve gravür kullandılar. Ek olarak, bilim insanları, mikro oda yüzeylerini, antikor bağlanması için aktive etmek üzere kimyasal olarak değiştiren bir yöntem eklediler. Bu yöntem, pahalı temiz oda ortamlarında metalik veya nanokarbon malzemelerin kullanılması gereken standart yaklaşımlara bir alternatif oldu.
Ekip, yakalanan bir antikoru ACSM-CL mikro odalarına bağlamak için prosedürleri ve spektroskopik olarak görselleştirilen altın nanopartiküller üzerine farklı bir (pozitif kontrol) saptama antikorunu optimize etti. Bu antikorların her ikisi de tüm eksozomlarda bulunan iki yüzey belirtecine özgüdür.
İlk doğrulama deneyi sırasında, ACSM-CL ayrıca 10 farklı doku ve kanser hücre hattından süpernatanlara salgılanan eksozomlara karşı test edildi. Eksozomları yakalama ve tespit etme yeteneği, negatif kontrollere kıyasla tüm test numunelerinde gözlemlenen spektroskopik kaymalarla doğrulandı. ACSM-CL, gönüllülerden toplanan 10 farklı gözyaşı örneğine karşı test edildiğinde de benzer sonuçlar elde edildi.
Eksozomlar çoğu hücrede oluşur ve idrar - gözyaşı gibi vücut sıvılarına salgılanır. Hatta eksozomların, orijinal hücrelerden istenmeyen maddeleri topladıklarına inanılıyordu; bununla birlikte, eksozomlar aslında hücreler arasında farklı biyomolekülleri taşıyabilir. Eksozomlar, kansere, viral enfeksiyonlara veya yaralanmaya yanıt olarak artan proteinlere sahiptir.
Eksozomlar, teşhis ve tedavi tahminine yardımcı olarak potansiyel bir kanser biyobelirteci olarak hareket etme yetenekleriyle ilgi uyandırdı. Eksozomları yeterli miktarda ve saflıkta izole etmenin zorlu doğası nedeniyle, bu araştırmalar kısıtlıydı. Eksozomları izole etmek için mevcut yöntemler, tamamlanması yaklaşık 10 saat süren ultrasantrifüj ve yoğunluk gradyanlarını içerdiğinden sıkıcı ve zaman alıcıdır. İzole edilmiş eksozomların saptanmasında başka zorluklar da vardır ve yaygın olarak kullanılan yöntemler, pahalı - yer kaplayan ekipmanlar gerektirir.
Bilim insanları, kanser biyobelirteçlerini tespit etmenin potansiyel bir yolu olarak gözyaşlarında bulunan eksozomları yakalamak için kontakt lensler geliştirdiler. Antikor konjuge sinyal mikro oda kontakt lenslerini (ACSM-CL) oluşturarak zorlu izolasyon yöntemleri gereksinimini ortadan kaldırmak için kontakt lens biyosensör tasarımı ve üretimindeki uzmanlıklarını kullandılar. Teknoloji, kanser biyobelirteçlerini keşfetmek için daha temiz ve daha optimum yöntem olan gözyaşlarından eksozomları yakalıyor.
Ekip, ACSM-CL'yi optimize ederken alternatif yaklaşımlar kullandı; hem odaların hem de merceğin yapısal olarak tutulması için geleneksel döküm kalıplama yerine doğrudan lazer kesim ve gravür kullandılar. Ek olarak, bilim insanları, mikro oda yüzeylerini, antikor bağlanması için aktive etmek üzere kimyasal olarak değiştiren bir yöntem eklediler. Bu yöntem, pahalı temiz oda ortamlarında metalik veya nanokarbon malzemelerin kullanılması gereken standart yaklaşımlara bir alternatif oldu.
Ekip, yakalanan bir antikoru ACSM-CL mikro odalarına bağlamak için prosedürleri ve spektroskopik olarak görselleştirilen altın nanopartiküller üzerine farklı bir (pozitif kontrol) saptama antikorunu optimize etti. Bu antikorların her ikisi de tüm eksozomlarda bulunan iki yüzey belirtecine özgüdür.
İlk doğrulama deneyi sırasında, ACSM-CL ayrıca 10 farklı doku ve kanser hücre hattından süpernatanlara salgılanan eksozomlara karşı test edildi. Eksozomları yakalama ve tespit etme yeteneği, negatif kontrollere kıyasla tüm test numunelerinde gözlemlenen spektroskopik kaymalarla doğrulandı. ACSM-CL, gönüllülerden toplanan 10 farklı gözyaşı örneğine karşı test edildiğinde de benzer sonuçlar elde edildi.
Kaynak
Bu rehber yardımcı oldu mu?
DoktorClub’da Keşfet
